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数字全息显微术,如何看得更细?
来源: | 作者:4SHQ | 发布时间: 987天前 | 1817 次浏览 | 分享到:
撰稿 | 马英 (西安电子科技大学,副教授)

说明 | 本文来自课题组投稿


自从 17 世纪光学显微镜被发明以来,就一直作为人类探索微观世界的重要工具,在许多领域发挥着不可替代的作用。然而,传统的光学显微镜只能获得样品的振幅信息,无法对透明样品进行高衬度的成像。因此,人们渴望获得一种非标记显微技术,能在自然状态下对透明样品(如活体细胞)进行长时间、高衬度跟踪观测

数字全息显微(Digital Holographic Microscopy, DHM,通过利用 CCD/CMOS 记录被放大的物光波和参考光波的干涉图样,可再现出透明样品高衬度、定量化的相位成像,被广泛应用于工业检测、生物医学成像等领域。然而, DHM 依然是一个衍射受限系统,其空间分辨能力一直较低,并且一直存在“大视场”和“高分辨”无法兼顾的矛盾。



图 1:数字全息显微镜的原理图

上世纪 90 年代以来,光学超分辨显微成像技术得到了快速的发展,该领域的领航者 S- W. Hell,E. Betzig 和 W. E. Moerner 被授予 2014 年诺贝尔化学奖。这些方法均采用了荧光标记,利用荧光的“光切换”特性来实现超分辨成像。在过去的几十年中,科学家们在提高 DHM(无标记显微技术)空间分辨率方面也做出了许多努力。


西安电子科技大学 郜鹏 教授和南京师范大学 袁操今 教授合作在 Light: Advanced Manufacturing 上发表了题为“Resolution enhancement of digital holographic microscopy via synthetic aperture: a review(基于合成孔径数字全息显微镜分辨率增强技术)”的综述论文,回顾了  DHM 中不同分辨率增强的方法,并比较了它们的优缺点。




DHM的分辨率由照明光波长照明全息记录系统的数值孔径所决定: δ=kλ/(NAillum+NAimag)DHM的分辨率增强方法可分为三种:


(1)照明调制技术
(2)全息记录系统的合成孔径技术
(3)深度学习辅助法

照明调制技术,采用离轴照明、结构光照明和散斑照明来提高 NAillum,最终在大视场下实现 DHM 空间分辨率的提高,同时还可以实现对厚样品的三维层析。全息记录(成像)信息增强方法,通过数字/物理扩增全息图或者采用压像元技术,来提高无透镜 DHM 的